分子生物学实验常用试剂配制方法
一、常用试剂、缓冲液配制
1M Tris-Hcl（pH7.4，7.6，8.0）和1.5 M Tris-Hcl（pH8.8）
配制方法：称取适量Tris碱，用蒸馏水溶解，用浓盐酸调节pH至所需值，再用蒸馏水定容至所需体积。
注意：Tris碱的溶解较慢，需加热或搅拌加速溶解。
10×TE buffer（pH7.4，7.6，8.0）
配制方法：将Tris-Hcl、EDTA（pH8.0）和蒸馏水按一定比例混合，调节pH至所需值。
注意：EDTA需用NaOH调节pH至8.0后再与Tris-Hcl混合。
3M 醋酸钠（pH5.2）
配制方法：称取适量醋酸钠，用蒸馏水溶解，用冰醋酸调节pH至5.2，再用蒸馏水定容。
PBS Buffer
配制方法：将NaCl、KCl、Na2HPO4和KH2PO4按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容。
10M 醋酸铵
配制方法：称取适量醋酸铵，用蒸馏水溶解并定容。
Tris Hcl平衡苯酚
配制方法：将苯酚与Tris-Hcl缓冲液按一定比例混合，平衡至所需pH值。
苯酚/氯仿/异丙醇（25：24：1）
配制方法：按体积比将苯酚、氯仿和异丙醇混合均匀。
10% （w/v）SDS
配制方法：称取适量SDS，用蒸馏水加热溶解并定容。
2 N NaOH
配制方法：称取适量NaOH，用蒸馏水溶解并定容。
2.5 N Hcl
配制方法：量取适量浓盐酸，用蒸馏水稀释并定容。
5 M Nacl
配制方法：称取适量NaCl，用蒸馏水溶解并定容。
20%（w/v）Glucose
配制方法：称取适量葡萄糖，用蒸馏水溶解并定容。
0.5 M EDTA
配制方法：称取适量EDTA，用NaOH调节pH至8.0，再用蒸馏水溶解并定容。
1 M DTT
配制方法：称取适量DTT，用蒸馏水或0.01M NaAc（pH5.2）溶解并定容。
10 mM ATP
配制方法：称取适量ATP，用蒸馏水或缓冲液溶解并定容。
二、蛋白质电泳相关试剂、缓冲液的配制方法
30% (w/v) 丙烯酰胺（Acrylamide）
配制方法：称取适量丙烯酰胺，用蒸馏水溶解并定容。注意丙烯酰胺有毒，需在通风橱中操作。
40% (w/v) 丙烯酰胺（Acrylamide）
配制方法与30%丙烯酰胺类似，但浓度更高。
10% (w/v) 过硫酸铵
配制方法：称取适量过硫酸铵，用蒸馏水溶解并定容。过硫酸铵易分解，需现用现配。
5×Tris-Glycine Buffer
配制方法：将Tris、甘氨酸和SDS按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容。
5×SDS-PAGE Loading Buffer
配制方法：将Tris-Hcl、SDS、溴酚蓝、甘油和β-巯基乙醇按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容。
考马斯亮蓝R-250染色液
配制方法：将考马斯亮蓝R-250溶于甲醇、乙酸和蒸馏水的混合液中，过滤后使用。
考马斯亮蓝脱色液
配制方法：将甲醇、乙酸和蒸馏水按一定比例混合。
凝胶固定液（SDS-PAGE银氨染色用）
配制方法：将乙醇、乙酸和蒸馏水按一定比例混合。
凝胶处理液（SDS-PAGE银氨染色用）
配制方法：将NaOH溶液与蒸馏水按一定比例混合。
凝胶染色液（SDS-PAGE银氨染色用）
配制方法：将硝酸银溶液与蒸馏水按一定比例混合，并加入少量甲醛。
显影液（SDS-PAGE银氨染色用）
配制方法：将碳酸钠溶液、甲醛和蒸馏水按一定比例混合。
三、核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法
50×TAE Buffer （PH8.5）和10×TAE Buffer （PH8.3）
配制方法：将Tris、乙酸和EDTA按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容，调节pH至所需值。
10×MOPS Buffer
配制方法：将MOPS、乙酸钠和EDTA按一定比例混合，用NaOH调节pH至7.0，再用蒸馏水定容。
溴乙锭（10mg/ml）
配制方法：称取适量溴乙锭，用蒸馏水溶解并定容。溴乙锭是强致癌物，需在通风橱中操作。
Agarose凝胶
配制方法：将琼脂糖溶于TAE或TBE缓冲液中，加热至完全溶解，再加入EB或其他染料，倒入模具中冷却凝固。
6×Loading Buffer（DNA电泳用）
配制方法：将EDTA、溴酚蓝、二甲苯青FF和甘油按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容。
10×Loading Buffer（RNA电泳用）
配制方法与6×Loading Buffer类似，但成分和比例可能有所不同。
四、核酸、蛋白质杂交用相关试剂、缓冲液的配制方法
20×SSC
配制方法：将NaCl和柠檬酸钠按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容。
20×SSPE Buffer
配制方法：将NaCl、NaH2PO4和EDTA按一定比例混合，用NaOH调节pH至7.4，再用蒸馏水定容。
50×Denhardt’s溶液
配制方法：将聚蔗糖、聚乙烯吡咯烷酮和Ficoll按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容。
0.5 mM磷酸盐Bufer
配制方法：将NaH2PO4和Na2HPO4按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容，调节pH至所需值。
Salmon DNA （鲑鱼精DNA）
配制方法：将鲑鱼精DNA溶于蒸馏水或缓冲液中，加热至完全溶解，过滤后使用。
DNA变性缓冲液
配制方法：将NaOH和EDTA按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容。
预杂交液/杂交液（DNA杂交用）
配制方法：将SSC、SDS、50×Denhardt’s溶液、Salmon DNA和甲酰胺按一定比例混合。
预杂交液/杂交液（RNA杂交用）
配制方法与DNA杂交用预杂交液/杂交液类似，但成分和比例可能有所不同。
膜转移缓冲液（Western杂交用）
配制方法：将Tris、甘氨酸和SDS按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容。
TBST Buffer（Western杂交膜清洗液）
配制方法：将Tris-Hcl、NaCl和Tween-20按一定比例混合，用蒸馏水溶解并定容。
封闭缓冲液（Western杂交用）
配制方法：将TBST Buffer与脱脂奶粉或BSA按一定比例混合。
五、实验室常用培养基的配制方法
配制方法：称取适量氨苄青霉素，用蒸馏水溶解并定容，过滤除菌后
