在《驯兽师与王子殿下》的故事中，我们遇到了一系列性格鲜明的角色，他们各有各的梦想和特质。
首先，蒂亚娜（Tiana），一个梦想成为优秀驯兽师的女孩，尽管还在见习阶段，但凭借父亲赠送的特制笛子，能掌控各种动物。她的迷糊性格与勇敢精神在寻找适合舞台演出的动物时展现无遗。在番外篇中，她化身成为一只猫咪，更加增添了神秘色彩。
玛提亚斯（Matheus）是法泽恩王国的第一王子，不仅剑术超群，头脑聪明，自信而充满魅力。他的荷尔蒙气息吸引着无数女孩，同时也是一位温柔坚强的领导者，肩负着王子的重任，他的变身动物是一只狮子。
阿尔弗莱德（Alfred）则是第二王子，热爱锻炼的他因为事故失去一只眼睛，这使他对玛提亚斯充满忠诚。他的稳重性格使他在士兵和骑士中备受爱戴，他的变身是一只狼，似乎预示着他的忠诚与坚毅。
路西亚（Lucia），第三王子，机智过人，虽然运动能力不强，但吵架时无人能敌，他的傲娇性格和活力使他变成鸭子显得格外合适。他关注自己的身材，总是担心过度饮食带来的影响。
埃里克（Erik）是年纪最小的王子，精神年龄稚嫩，热爱艺术，尤其与他的青蛙玩偶卡斯巴尔形影不离。他撒娇可爱，但可能隐藏着不为人知的一面，变身成兔子，增添了几分童趣。
最后是克拉乌斯（Klaus），与主角是青梅竹马，眼神犀利，给人以距离感。他的严苛言语常常让蒂亚娜落泪，曾是玛提亚斯的朋友，角色充满了复杂的情感纠葛。
而药局的青年希鲁比奥（Silvio）则以他的友善笑容和萌系形象，温暖着每一个顾客的心，他的变身是一只额头有咒印的紫色猫咪，更加增添了角色的可爱之处。
女主人公一直希望能成为她母亲那样优秀的驯兽师。一天，她为了训练而买下四只动物。正当她给它们喂食的时候，这四只动物居然开口说人话了。这几只动物是被魔法诅咒，变成了动物的邻国法泽恩的王子们。于是为了解除王子们身上的诅咒，女主人公开始四处奔走。游戏开始是驯兽师和变成动物的王子们的互动，后半则是转变成追查将王子变成动物的犯人，并围绕王位继承权的阴谋而展开的故事。
